冷やしてはいけない検体―髄液だけが冷蔵庫に入らない理由
第105回医師国家試験 F問題 第1問
国試問題にチャレンジ
細菌検査の検体で原則として室温保存するのはどれか。
- a.尿
- b.便
- c.喀痰
- d.髄液
- e.胸水
対話形式の解説
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクター
医学生
ドクターまとめ
細菌検査の検体保存は、「目的菌を死なせない」ことと「混入菌を増やさない」ことの両立で考えます。尿・便・喀痰・胸水などは常在菌の混入や増殖が問題となるため、すぐに検査できなければ冷蔵(約4℃)保存が原則です。一方、髄液は無菌的に採取される検体であり、細菌性髄膜炎の主な起因菌である髄膜炎菌・インフルエンザ菌・肺炎球菌が低温に弱いため、冷蔵せず室温で保存し、遅れる場合は35〜37℃で保温して速やかに提出します。血液培養ボトルも同様に冷蔵禁止です。保存温度を菌の性質から理解しておくことは、培養の偽陰性・偽陽性を防ぎ、感染症診療の確かな第一歩となります。
解答・解説
正解はdです
細菌検査の検体は、採取してから培養を始めるまでの間に「目的菌が死滅しないこと」と「混入した常在菌や雑菌が増えすぎないこと」の両方を満たすように保存する必要がある。
冷蔵保存(約4℃)が原則となる検体
尿、便、喀痰など、採取の過程で常在菌が混入しやすい、あるいはもともと多数の菌を含む検体である。室温に置くと混入菌が増殖し、原因菌が埋もれたり、尿のように菌数で判定する検査では偽陽性の原因になったりする。冷蔵によって菌の増殖を抑え、採取時点の菌の状態を保つ。
冷蔵してはならない検体
髄液と血液(血液培養ボトル)である。いずれも本来無菌で、清潔操作で採取されるため雑菌増殖の心配は小さい。一方、細菌性髄膜炎の主な起因菌である髄膜炎菌(Neisseria meningitidis)、インフルエンザ菌(Haemophilus influenzae)、肺炎球菌(Streptococcus pneumoniae)は低温に弱く、冷蔵すると死滅して培養で検出できなくなるおそれがある。そのため髄液は室温で保存し、できるだけ速やかに検査室へ提出する(夜間などで提出が遅れる場合は35〜37℃の孵卵器に入れる)。 したがって、原則として室温保存とするのは髄液である。 なお、「室温」の定義は一定しておらず、日本薬局方では室温を1〜30℃、常温を15〜25℃としている。室温を1〜30℃と広く取ると低温域も含まれてしまうため、臨床の場では「冷蔵庫に入れず、体温に近い温度を保ち、速やかに提出する」ことが本質である。
選択肢考察
- ×a. 尿
誤り。尿は膀胱内では本来無菌だが、排尿時に尿道口や外陰部の常在菌が混入しやすい。尿路感染症の診断は菌数(例: 中間尿で10^5 CFU/mL以上など)で判定するため、室温に放置して混入菌が増殖すると偽陽性となる。採取後2時間以内の検査が望ましく、すぐに提出できない場合は冷蔵(4℃)で保存する。混入を減らすため、中間尿の正しい採り方を患者に説明することも大切である。
- ×b. 便
誤り。便には大量の腸内常在菌が含まれており、室温に置くと常在菌が増えて病原菌の検出が難しくなるため、原則として冷蔵保存する。ただし赤痢菌(Shigella)のように低温や乾燥に弱い菌を目的とする場合は、輸送培地(Cary-Blair培地など)を用い、速やかに提出するなどの配慮が必要となる。
- ×c. 喀痰
誤り。喀痰は喀出の際に口腔・咽頭の常在菌が必ず混入する検体であり、放置すると常在菌が増殖して原因菌の判定を妨げる。すぐに検査できない場合は冷蔵(4℃)保存とする。なお、唾液成分が多い検体は評価に適さないため、うがい後に深い咳で膿性部分を採取させることが重要である(肉眼的品質評価にはMiller & Jones分類が用いられる)。
- ○d. 髄液
正しい。髄液は腰椎穿刺により清潔操作で採取される本来無菌の検体で、雑菌の増殖を抑える目的で冷蔵する必要性は低い。一方、細菌性髄膜炎の主要な起因菌である髄膜炎菌、インフルエンザ菌、肺炎球菌は低温で死滅しやすく、冷蔵すると培養が陰性化するおそれがある。このため髄液は室温で保存し、ただちに検査室へ提出する。提出までに時間がかかる場合は35〜37℃の孵卵器で保温する。なお、ウイルス検査のみを目的とする場合は冷蔵してよいが、臨床の場では細菌性髄膜炎を否定できないことが多いため、細菌培養用の検体は室温で扱うのが原則である。
- ×e. 胸水
誤り。胸水も穿刺により清潔操作で採取されるが、髄液に比べて皮膚常在菌などが混入する機会があり、また低温に特に弱い菌が主な標的ではないため、細菌検査では冷蔵(4℃)保存が一般的である。腹水・関節液・膿などの穿刺液も同様に扱い、できるだけ多くの量を採取する。嫌気性菌を疑う場合は、空気に触れないよう嫌気ポーターなどの専用容器に入れて速やかに提出する。
細菌検査検体の保存温度の整理
・冷蔵(約4℃):尿、便、喀痰、胸水・腹水などの穿刺液、膿など ・室温(冷蔵禁止):髄液、血液培養ボトル(すぐに提出できない場合は35〜37℃の孵卵器でもよい)
冷蔵してはいけない理由となる主な菌
・髄膜炎菌(Neisseria meningitidis):低温で急速に死滅する。 ・淋菌(Neisseria gonorrhoeae):同じナイセリア属で低温・乾燥に弱い。 ・インフルエンザ菌(Haemophilus influenzae)、肺炎球菌(Streptococcus pneumoniae):低温で生存性が低下し、肺炎球菌は自己融解もしやすい。
検体採取の原則
・抗菌薬投与前に採取する。 ・常在菌の混入をできるだけ避ける(中間尿、膿性痰の選択、皮膚消毒など)。 ・採取後はできるだけ速やかに検査室へ提出する。保存はあくまで提出が遅れる場合の次善策である。
温度の用語
日本薬局方では標準温度20℃、常温15〜25℃、室温1〜30℃、微温30〜40℃と定義されている。
POINT
・雑菌が混入しやすい、あるいは多くの菌を含む検体(尿、便、喀痰など)は冷蔵保存が原則。 ・髄液と血液培養は冷蔵禁止で、室温(または35〜37℃)で保存し速やかに提出する。 ・理由は、髄膜炎菌・インフルエンザ菌・肺炎球菌などの髄膜炎起因菌が低温に弱いためである。
