迅速診断の検体は「生のまま、乾かさず」―凍結切片を支える手術室での一手間

正解はdです

選択肢考察

1. ×a.  アルコール固定液につける。

   アルコール（エタノールなど）は蛋白質を脱水・凝固させることで組織や細胞を固定する。細胞診のPapanicolaou染色を行う塗抹標本の湿固定（95%エタノール）や、グリコーゲンなど水に溶けやすい成分を保存したい場合の組織固定などに用いられる。いずれも固定を前提とした標本作製の処理であり、生の組織を凍結させる術中迅速診断の検体を入れるものではない。

2. ×b.  ホルマリン固定液につける。

   ホルマリン（ホルムアルデヒド水溶液）は、通常の病理組織標本（永久標本）をつくるときの標準的な固定液である。一般に10〜20%の中性緩衝ホルマリンが用いられ、固定後に脱水・脱脂・パラフィン包埋・薄切・染色という工程を経るため、標本完成までに通常は数日を要する。術中迅速診断の検体をホルマリンに入れると凍結切片の作製・判読に適さなくなるため誤りである。なお、迅速診断に用いた組織も、診断後には解凍してホルマリン固定し、改めて永久標本を作製して最終診断を確認する。

3. ×c.  ドライヤーでよく乾燥させる。

   組織を乾燥させると、細胞が収縮・変性して核や細胞質の形態が崩れ、正確な組織診断ができなくなる。組織検体は乾燥を避けるのが原則であり、ドライヤーで乾かすことは行わない。なお、細胞診ではMay-Giemsa染色などのGiemsa系染色を行う場合に、塗抹標本を速やかに風乾（空気乾燥）させる方法がとられるが、これは組織の迅速診断とは別の手技である。

4. ○d.  生理食塩液で湿らせたガーゼで包む。

   生理食塩液は細胞外液とほぼ等張であるため、組織を浸透圧の変化で傷めることなく、乾燥から守ることができる。採取した組織は固定せずに、生理食塩液で軽く湿らせたガーゼに包み、速やかに病理検査室へ提出する。病理検査室では、この未固定の新鮮組織を急速凍結して凍結切片を作製し、主にHE（ヘマトキシリン・エオジン）染色を行って診断する。なお、ガーゼを過度に濡らしたり組織を生理食塩液に長時間浸けたりすると、組織が水分を含みすぎて凍結時の氷晶による人工的変化（アーチファクト）が増えるため、「軽く湿らせる」程度にとどめるのがよい。

5. ×e.  グルタールアルデヒド固定液につける。

   グルタールアルデヒドは、蛋白質どうしを強く架橋して細胞内の微細構造（細胞小器官や膜構造）をよく保つため、電子顕微鏡用の検体の固定に用いられる（前固定にグルタールアルデヒド、後固定に四酸化オスミウムを用いるのが一般的である）。腎生検の電子顕微鏡検索などで使われるが、術中迅速診断には用いない。